非洲猪瘟抗原(重组蛋白)
非洲猪瘟抗原(重组蛋白)
非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)是非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)中唯一属于核质大型DNA病毒组的成员,具有多层膜和蛋白质层的复杂结构。
ASFV磷蛋白p30是早期病毒蛋白之一,由CP204L基因编码,相对分子质量为30 kDa。它是与ASFV进入最相关的抗原性结构蛋白之一。这种蛋白质位于病毒包膜的内层。一般在感染后约2 - 4小时观察到p30的表达,然后持续到感染周期。因此,p30的表达表明病毒已经进入并脱包,开始了早期的病毒基因表达。P30蛋白是免疫原性的,在ASFV感染期间刺激最高水平的病毒抗体反应。
ASFV蛋白p54是与病毒进入相关的结构蛋白之一,是由E183L基因编码的一种非常关键的ASFV抗原结构蛋白,相对分子质量为25 kDa。该蛋白由三部分组成,包括跨膜结构域、Gly-Gly-X基序和处理几种ASFV结构蛋白的识别序列。该蛋白位于病毒粒子的脂质外膜,通过靠近蛋白c端motif直接与动力蛋白轻链8结合,与微管马达复合体相互作用。此外,p54还影响包膜前体向组装位点的募集,并在猪接种减毒病毒株后病毒生长和诱导特异性抗体中发挥重要作用。
主要的衣壳蛋白p72由病毒基因B646L编码,组装ASFV的主要外层蛋白外壳。蛋白质p72是病毒粒子最主要的结构成分,相对分子质量为73.2 kDa,使其成为感染猪中检测到的主要抗原之一。在病毒感染后期,病毒衣壳的形成具有重要意义。p72的结构是由3个p72分子组成的高度为~85 Å,直径为~85 Å的稳定三聚体尖。p72单体采用双胶辊结构。两个胶辊β-桶构成了三聚体的伪六边形基底,胶辊桶β-股之间的插入物构成了三聚体的突出顶部。
ASFV蛋白pp62是ASFV多蛋白前体之一,由相对分子质量为60.5 kDa的CP530R基因编码。该蛋白可被S273R蛋白裂解成成熟病毒粒子蛋白p35和p15。pp62和另一个多聚蛋白前体pp220的成熟产物在病毒衣壳的组装过程中起着至关重要的作用。pp62和病毒组装的过程同时发生。如果pp62的处理被阻断,就会出现无核或缺乏传染性的病毒颗粒。
asfv cd2v是由ep402r基因编码的一种囊膜糖蛋白,其胞外区免疫球蛋白样结构域的氨基酸序列与宿主的cd2蛋白相似,可在t细胞和nk细胞中表达;胞内区部分与宿主的cd2蛋白没有明显的相似性。该蛋白能使病毒感染的细胞及细胞外病毒颗粒吸附红细胞,促进病毒在宿主体内的扩散、传播。同时,研究者根据cd2v的hai特性,在原有asfv毒株依据p72基因分为基因i型/ii型的基础上将病毒进行血清型的分类。由此可见,基于cd2v蛋白的研究意义重大。其单克隆抗体的制备,可为asfv检测及其cd2v蛋白的结构解析提供重要工具。
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